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cdna可以保存多久 CDNA长期保存方法有哪些

1、cdna的存储方式

在讨论cdna可以保存多久之前,我们需要先了解cdna的存储方式。cdna是一种基因剪切技术,通过反转录将mRNA转化为cDNA,通常使用RNA逆转录酶,然后通过PCR扩增等方法制备而成。因此,cdna的存储方式与反转录和PCR指导的DNA存储方式类似。

cdna在溶于TE缓冲液(Tris-EDTA缓冲液)中时,可以在-20℃下长期保存。此外,部分实验室也将cdna溶于ddH2O,并在-20℃或-80℃下保存。

2、cdna的降解机制

cdna的降解机制与DNA的降解机制类似,主要是由内源的核酸酶和外源的环境因素引起的。内源性核酸酶包括核酸酶、DNase和RNase等。这些酶可以降解cdna的磷酸酯键,导致cdna分子链的断裂。

外源性因素包括温度、酸碱度、辐射等。在高温或低温下,cdna分子链可能会脱离单链状态,导致链断裂。在酸性或碱性环境中,酸碱性可能会引起cdna分子的降解。此外,辐射也可能引起cdna的降解,因为辐射可以破坏DNA分子的结构。

3、cdna的保存条件

对于cdna的保存,以下是几点需要注意的条件:

1)保存温度:-20℃是cdna保存的最佳温度,因为低温可以减缓核酸酶和其他外源因素造成的降解速度。

2)防止冻融循环:反复冷冻和解冻会损害cdna的完整性。

3)避光:cdna容易受到紫外线的破坏,因此,在存储cdna时应避免暴露在光线下。

4)使用两个管道进行存储:为了防止cdna样本的交叉污染和损坏,最好使用两个管道(例如Eppendorf管)进行存储。其中一个管道用于存储cdna样品,另一个管道仅用于存储分子生物学试剂。

4、cdna的保存期限

cdna的保存期限取决于存储条件和其他因素。在-20℃下,如果适当地保存,cdna可以长期存储。但是,由于cdna分子的自然降解过程,存储时间越长,cdna分子链的完整性就越容易受到影响。因此,建议从长期存储到密封,尽快使用cdna样本。具体的存储期限可能会因样品质量和存储条件而有所不同。

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